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更新時間:2026-05-27
瀏覽次數:1471.產品簡介:
基質金屬蛋白酶 (MMP) 屬于金屬蛋白酶家族,該家族由至少 20 個成員組成,并且已知參與細胞外基質蛋白的代謝。基質金屬蛋白酶是一類活性依托鋅、鈣離子發揮作用的蛋白水解酶,在生物體內分布廣泛。這類酶核心作用為分解代謝細胞外基質物質,深度參與胚胎生長發育、機體組織修復、創面愈合以及血管新生等生理活動,保障機體組織形態與結構維持正常狀態。該物質的活性水平處于動態調控之中,一旦表達量與活性出現異常紊亂,就會損傷組織固有屏障。其功能失調和腫瘤侵襲轉移、關節病變、血管硬化、器官纖維化等諸多病癥息息相關,酶與體內抑制物質相互制衡,共同守護機體生理運作平衡。MMP 可通過酶譜法廣泛檢測。本試劑盒提供了一個簡單的酶譜電泳系統,用于檢測血液、體液、分泌物、細胞裂解液、細胞培養基等樣品中的MMP2,MMP9酶譜及活性。
2.檢測原理:
本方法借助 SDS - 聚丙烯酰胺凝膠電泳聯合凝膠染色技術,能夠同步檢測 MMP-2、MMP-9 活性以及無活性前體酶原譜系,檢測靈敏度可達nM級別,檢測性能優于 ELISA 檢測方式。
實驗預先制備混合明膠底物的電泳凝膠,將待測生物樣本加入凝膠體系完成電泳分離。電泳體系內的SDS可與基質金屬蛋白酶可逆結合,破壞蛋白空間構象,暫時抑制酶的水解活性,保障蛋白依據分子量差異完成有效分離。電泳結束后取出凝膠與酶反應Buffer孵育,MMP恢復活性,凝膠中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶條帶的位置,蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮區域,從而能同時指示MMP-2、MMP-9 的大小位置(酶譜)及活性。
3.檢測目的:
本試劑盒主要用于檢測相關的組織、細胞中MMP-2、MMP-9 酶譜活性。
本試劑盒可進行50 次標準膠檢測,如果每塊膠加樣孔可以10個以上,總體可以檢測500個樣本以上。
4.試劑盒組成:
1.凝膠基底液 A(10X)50ml-20℃保存需稀釋10倍使用
2.洗滌液B液(10X)50ml 4 oC保存需稀釋10倍使用
3.孵育液C液(10X)50ml 4 oC保存需稀釋10倍使用
4.上樣緩沖液 D液(2X)1.5ml-20℃保存
5.考馬斯亮藍染色液 E液50ml 4 oC保存
備注: 以上10倍稀釋可以采用蒸餾水進行稀釋
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